核酸提取
『壹』 如何選擇一款合適的核酸提取儀
選擇合適的核酸提取儀應該根據個人要求而定,下面簡單介紹:
從提取原理上來看,有離心柱法、磁珠法;離心柱法全自動核酸提取儀採用離心機和自動移液裝置想結合的方法。
自動核酸提取儀該儀器通量為32個,具有8個獨立溫控加熱槽,帶紫外滅菌裝置,採用直線電機,能帶動磁力棒迅速對樣本攪拌和混勻,整個提取時間20-40分鍾,節約了時間。
『貳』 核酸的提取
要回答這個問題要確定你是在哪一步發現降解了。
是在質粒提取後後,直接點樣發現降解的話,可能是提取過程中大腸桿菌富含DNase,或是操作過程中鹼裂解過長
如果是在酶切過程中降解了,可能有鹽離子污染導致特異性酶變成非特異性酶了,把質粒都降解了。
如果是在保存一段時間發現降解了,可能是保存液不是TE或是質粒發生了降解。具體要分析一下
『叄』 核酸提取時,用異丙醇和乙醇的區別是什麼
核酸提取時,用異丙醇和乙醇的區別是什麼
異丙醇比較疏水,能很更好地沉澱核酸,用乙醇的目的是去鹽,它比異丙醇更親水,所以能去掉一些鹽離子.有時還用70%的乙醇洗樣品也是為了增加鹽的溶解度.在沉澱核酸時可用乙醇與異丙醇,乙醇的極性要強於異丙醇,所以一般用2倍體積乙醇沉澱,但在多糖、蛋白含量高時,用異丙醇沉澱可部分克服這種污染,尤其用異丙醇在室溫下沉澱對擺脫多糖、雜蛋白污染更為有效.
異丙醇沉澱核酸時,高濃度鹽存在將使大量多糖存在在溶液中,從而可達到去多糖的作用.但高濃度的鹽存在會影響核酸的進一步操作,因此必須用乙醇多次洗滌脫鹽
『肆』 核酸提取儀的主要步驟及方法
核酸提取儀,是應用配套的核酸提取試劑來自動完成樣本核酸的提取工作的儀器,核酸提取儀分為兩類:一類是大型的自動化的,一般稱為自動液體工作站;另一類是小型自動核酸提取儀,利用封裝好的配套試劑自動完成提取純化過程。大型自動液體工作站因為設備成本高昂,運行成本高,適合一次提取幾千個同一種類標本,所以真正得到應用的比較少;而小型自動化的儀器,因為儀器設備和運行成本低,操作方便 得到越來越多的應用。
Nucleic Acid Extraction System是使用通用磁珠法提取核酸的高科技產品,具有自動化程度高,提取速度快,結果穩定,操作簡便的優點。利用一般生化專用的96孔反應盤,可同時操作1-32個樣品,可廣泛應用於常規科研、基因組學、疾控系統、食品安全、法醫等領域。使用本儀器只需加入樣品與以磁珠為載體的全自動核酸提取試劑於96孔專用反應盤中,選擇或編輯適當程序後執行即可。搭配不同種類的磁珠核酸試劑組,可以快速提取動植物組織、血液、體液、刑事檢體等樣品中的DNA和RNA
大屏幕全中文操作
大屏幕全中文顯示;觸屏式操作,簡單易用。
精確控制
內建工程用電腦,無需再連接個人電腦;單機操作節省更多的空間與能源,並提供高穩定度的自動化控制系統。
溫度控制
可根據需求自定義裂解、洗脫溫度。
自由編程
強大的程序編輯功能;靈活、高效地定義您的應用,可滿足不同試劑要求。
快速提取
操作時間短,30-60分鍾/次;適量大,每次可同時提取1-32份樣品。
高純度、高得率
可根據試劑優化提純方案,配合精確的溫育時間,實現了更高的提取效率,提取的DNA/RNA純度高,可以直接用於PCR和RT-PCR。
結果穩定
避免人工操作引起的差異及錯誤,結果溫度,重復性好。
自我清潔
具有內置可定時紫外消毒功能。
污染控制
嚴格控制孔間污染及批次間污染,杜絕交叉污染。
試劑開放
可使用各種磁珠法提取試劑。
安全可靠
開門自動鎖定保障操作安全;封閉提取倉,一次性耗材,最大程度減少操作者與試劑的接觸;智能化操作,避免有害物質對人體的危害。
『伍』 核酸提取過程中,哪些因素會影響
1.固定劑對DNA的影響固定劑的類型直接影響提取DNA的質量.
2.固定時間對DNA的影響固定過程中所發生的組織反應至今尚未被完全理解,雖然理論上講室溫下福爾馬林與DNA幾乎不發生的,但已發現鹼基與組蛋白之間的甲基交聯.
3.固定溫度等其他因素對DNA的影響核酸與固定劑的反應由反應成分、濃度、酸礆度以及溫度等因素的調節,其中溫度效應顯得特別重要.
4.組織處理過程對DNA的影響我們發現,從常規組織處理的蠟塊中提取的DNA,其大部分分子量晨100bp-10000bp之間,主要分布於100-1500bp,僅約1/3的組織所提取DNA>20kb.
望採納,謝謝
『陸』 核酸提取儀原理
1. 根據儀器型號大小不同劃分 [1]
1) 自動液體工作站
自動液體工作站是功能非常強大的設備,液體分液、吸液等自動完成,甚至能通過整合擴增、檢測等功能,實現標本提取、擴增、檢測全自動化。提取核酸只是其功能的一個應用,不太適合常規實驗室提取核酸,一般都應用在單一類標本並且一次提取標本量非常大(至少96個,一般幾百個)的實驗需求上。自動工作站的平台建立及平台的運作,需要比較大的資金。
2) 小型自動核酸提取儀
小型的自動化儀器是通過運行結構的特殊性來達到自動提取核酸的目的,可以在任何實驗室得到應用。
2. 根據提取原理不同劃分
1) 採用離心柱法的儀器
離心柱法核酸提取儀主要採用離心機和自動移液裝置相結合的方法,通量一般在1-12個樣本,操作時間和手工提取差不多,並不能提高實際工作效率,且價格昂貴,不同型號儀器的耗材也不能通用,僅適合經費充足的大型實驗室使用。
2) 採用磁珠法的儀器
以磁珠為載體,利用磁珠在高鹽低PH值下吸附核酸,在低鹽高PH值下與核酸分離的原理,再通過移動磁珠或轉移液體來實現核酸的整個提取純化過程。由於其原理的獨特性,所以可設計成很多種通量,既可以單管提取,也可以提取8-96個樣本,且其操作簡單快捷,提取96個樣本僅需30-45min,大大提高了實驗效率,且成本低廉,因而可以在不同實驗室使用,是目前市場上的主流儀器。
磁珠法核酸提取儀的基本原理
磁珠法核酸提取儀一般分為抽吸法和磁棒法兩種 [2] :
1. 抽吸法,也叫移液法,是通過固定磁珠、轉移液體來實現核酸的提取,一般通過操作系統控制機械臂來實現轉移。提取過程如下:
1) 裂解:在樣品中加入裂解液,通過機械運動及加熱實現反應液的混勻及充分反應,細胞裂解,釋放核酸。
2) 吸附:在樣品裂解液中加入磁珠,充分混勻,利用磁珠在高鹽低PH值下對核酸具有很強親和力的特點,吸附核酸,在外加磁場作用下,磁珠與溶液分離,利用吸頭將液體移出棄至廢液槽,吸頭棄掉。
3) 洗滌:撤去外加磁場,換用新吸頭加入洗滌緩沖液,充分混勻,去除雜質,在外加磁場作用下,將液體移出。
4) 洗脫:撤去外加磁場,換用新吸頭加入洗脫緩沖液,充分混勻,結合的核酸即與磁珠分離,從而得到純化的核酸。
『柒』 核酸提取試劑盒歸哪一類醫療器戒
核酸提取試劑屬於診斷試劑的范圍,I類
診斷試劑分類:
第三類
1.與致病性病原體抗原、抗體以及核酸等檢測相關的試劑;
2.與血型、組織配型相關的試劑;
3.與人類基因檢測相關的試劑;
4.與遺傳性疾病相關的試劑;
5.與麻醉葯品、精神葯品、醫療用毒性葯品檢測相關的試劑;
6.與治療葯物作用靶點檢測相關的試劑;
7.與腫瘤標志物檢測相關的試劑;
8.與變態反應(過敏原)相關的試劑。
第二類
第二類產品:除已明確為第三類、第一類的產品,其他為第二類產品,主要包括:
1.用於蛋白質檢測的試劑;
2.用於糖類檢測的試劑;
3.用於激素檢測的試劑;
4.用於酶類檢測的試劑;
5.用於酯類檢測的試劑;
6.用於維生素檢測的試劑;
7.用於無機離子檢測的試劑;
8.用於葯物及葯物代謝物檢測的試劑;
9.用於自身抗體檢測的試劑;
10.用於微生物鑒別或葯敏試驗的試劑;
11.用於其他生理、生化或免疫功能指標檢測的試劑。
第一類
1.微生物培養基(不用於微生物鑒別和葯敏試驗);
2.樣本處理用產品,如溶血劑、稀釋液、染色液等。
『捌』 簡述提取核酸的步驟
一、DNA的分離
利用核蛋白溶於水和高鹽溶液,但不溶於生理鹽溶液的性質進行分離。
流程:破細胞→濃鹽溶液提取→生理鹽溶液沉澱→苯酚變性除蛋白→水相DNA用冷乙醇沉澱。
『玖』 進口全自動核酸提取純化儀哪些廠家的比較好
台灣圓點、美國的SAB、MPfastprep-24、羅氏、貝克曼庫爾特、德國QIAGEN個人覺得大同小異,主要得看是不是真的自動化還有試劑盒耗材價格如何。