核酸提取
『壹』 如何选择一款合适的核酸提取仪
选择合适的核酸提取仪应该根据个人要求而定,下面简单介绍:
从提取原理上来看,有离心柱法、磁珠法;离心柱法全自动核酸提取仪采用离心机和自动移液装置想结合的方法。
自动核酸提取仪该仪器通量为32个,具有8个独立温控加热槽,带紫外灭菌装置,采用直线电机,能带动磁力棒迅速对样本搅拌和混匀,整个提取时间20-40分钟,节约了时间。
『贰』 核酸的提取
要回答这个问题要确定你是在哪一步发现降解了。
是在质粒提取后后,直接点样发现降解的话,可能是提取过程中大肠杆菌富含DNase,或是操作过程中碱裂解过长
如果是在酶切过程中降解了,可能有盐离子污染导致特异性酶变成非特异性酶了,把质粒都降解了。
如果是在保存一段时间发现降解了,可能是保存液不是TE或是质粒发生了降解。具体要分析一下
『叁』 核酸提取时,用异丙醇和乙醇的区别是什么
核酸提取时,用异丙醇和乙醇的区别是什么
异丙醇比较疏水,能很更好地沉淀核酸,用乙醇的目的是去盐,它比异丙醇更亲水,所以能去掉一些盐离子.有时还用70%的乙醇洗样品也是为了增加盐的溶解度.在沉淀核酸时可用乙醇与异丙醇,乙醇的极性要强于异丙醇,所以一般用2倍体积乙醇沉淀,但在多糖、蛋白含量高时,用异丙醇沉淀可部分克服这种污染,尤其用异丙醇在室温下沉淀对摆脱多糖、杂蛋白污染更为有效.
异丙醇沉淀核酸时,高浓度盐存在将使大量多糖存在在溶液中,从而可达到去多糖的作用.但高浓度的盐存在会影响核酸的进一步操作,因此必须用乙醇多次洗涤脱盐
『肆』 核酸提取仪的主要步骤及方法
核酸提取仪,是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸的提取工作的仪器,核酸提取仪分为两类:一类是大型的自动化的,一般称为自动液体工作站;另一类是小型自动核酸提取仪,利用封装好的配套试剂自动完成提取纯化过程。大型自动液体工作站因为设备成本高昂,运行成本高,适合一次提取几千个同一种类标本,所以真正得到应用的比较少;而小型自动化的仪器,因为仪器设备和运行成本低,操作方便 得到越来越多的应用。
Nucleic Acid Extraction System是使用通用磁珠法提取核酸的高科技产品,具有自动化程度高,提取速度快,结果稳定,操作简便的优点。利用一般生化专用的96孔反应盘,可同时操作1-32个样品,可广泛应用于常规科研、基因组学、疾控系统、食品安全、法医等领域。使用本仪器只需加入样品与以磁珠为载体的全自动核酸提取试剂于96孔专用反应盘中,选择或编辑适当程序后执行即可。搭配不同种类的磁珠核酸试剂组,可以快速提取动植物组织、血液、体液、刑事检体等样品中的DNA和RNA
大屏幕全中文操作
大屏幕全中文显示;触屏式操作,简单易用。
精确控制
内建工程用电脑,无需再连接个人电脑;单机操作节省更多的空间与能源,并提供高稳定度的自动化控制系统。
温度控制
可根据需求自定义裂解、洗脱温度。
自由编程
强大的程序编辑功能;灵活、高效地定义您的应用,可满足不同试剂要求。
快速提取
操作时间短,30-60分钟/次;适量大,每次可同时提取1-32份样品。
高纯度、高得率
可根据试剂优化提纯方案,配合精确的温育时间,实现了更高的提取效率,提取的DNA/RNA纯度高,可以直接用于PCR和RT-PCR。
结果稳定
避免人工操作引起的差异及错误,结果温度,重复性好。
自我清洁
具有内置可定时紫外消毒功能。
污染控制
严格控制孔间污染及批次间污染,杜绝交叉污染。
试剂开放
可使用各种磁珠法提取试剂。
安全可靠
开门自动锁定保障操作安全;封闭提取仓,一次性耗材,最大程度减少操作者与试剂的接触;智能化操作,避免有害物质对人体的危害。
『伍』 核酸提取过程中,哪些因素会影响
1.固定剂对DNA的影响固定剂的类型直接影响提取DNA的质量.
2.固定时间对DNA的影响固定过程中所发生的组织反应至今尚未被完全理解,虽然理论上讲室温下福尔马林与DNA几乎不发生的,但已发现碱基与组蛋白之间的甲基交联.
3.固定温度等其他因素对DNA的影响核酸与固定剂的反应由反应成分、浓度、酸硷度以及温度等因素的调节,其中温度效应显得特别重要.
4.组织处理过程对DNA的影响我们发现,从常规组织处理的蜡块中提取的DNA,其大部分分子量晨100bp-10000bp之间,主要分布于100-1500bp,仅约1/3的组织所提取DNA>20kb.
望采纳,谢谢
『陆』 核酸提取仪原理
1. 根据仪器型号大小不同划分 [1]
1) 自动液体工作站
自动液体工作站是功能非常强大的设备,液体分液、吸液等自动完成,甚至能通过整合扩增、检测等功能,实现标本提取、扩增、检测全自动化。提取核酸只是其功能的一个应用,不太适合常规实验室提取核酸,一般都应用在单一类标本并且一次提取标本量非常大(至少96个,一般几百个)的实验需求上。自动工作站的平台建立及平台的运作,需要比较大的资金。
2) 小型自动核酸提取仪
小型的自动化仪器是通过运行结构的特殊性来达到自动提取核酸的目的,可以在任何实验室得到应用。
2. 根据提取原理不同划分
1) 采用离心柱法的仪器
离心柱法核酸提取仪主要采用离心机和自动移液装置相结合的方法,通量一般在1-12个样本,操作时间和手工提取差不多,并不能提高实际工作效率,且价格昂贵,不同型号仪器的耗材也不能通用,仅适合经费充足的大型实验室使用。
2) 采用磁珠法的仪器
以磁珠为载体,利用磁珠在高盐低PH值下吸附核酸,在低盐高PH值下与核酸分离的原理,再通过移动磁珠或转移液体来实现核酸的整个提取纯化过程。由于其原理的独特性,所以可设计成很多种通量,既可以单管提取,也可以提取8-96个样本,且其操作简单快捷,提取96个样本仅需30-45min,大大提高了实验效率,且成本低廉,因而可以在不同实验室使用,是目前市场上的主流仪器。
磁珠法核酸提取仪的基本原理
磁珠法核酸提取仪一般分为抽吸法和磁棒法两种 [2] :
1. 抽吸法,也叫移液法,是通过固定磁珠、转移液体来实现核酸的提取,一般通过操作系统控制机械臂来实现转移。提取过程如下:
1) 裂解:在样品中加入裂解液,通过机械运动及加热实现反应液的混匀及充分反应,细胞裂解,释放核酸。
2) 吸附:在样品裂解液中加入磁珠,充分混匀,利用磁珠在高盐低PH值下对核酸具有很强亲和力的特点,吸附核酸,在外加磁场作用下,磁珠与溶液分离,利用吸头将液体移出弃至废液槽,吸头弃掉。
3) 洗涤:撤去外加磁场,换用新吸头加入洗涤缓冲液,充分混匀,去除杂质,在外加磁场作用下,将液体移出。
4) 洗脱:撤去外加磁场,换用新吸头加入洗脱缓冲液,充分混匀,结合的核酸即与磁珠分离,从而得到纯化的核酸。
『柒』 核酸提取试剂盒归哪一类医疗器戒
核酸提取试剂属于诊断试剂的范围,I类
诊断试剂分类:
第三类
1.与致病性病原体抗原、抗体以及核酸等检测相关的试剂;
2.与血型、组织配型相关的试剂;
3.与人类基因检测相关的试剂;
4.与遗传性疾病相关的试剂;
5.与麻醉药品、精神药品、医疗用毒性药品检测相关的试剂;
6.与治疗药物作用靶点检测相关的试剂;
7.与肿瘤标志物检测相关的试剂;
8.与变态反应(过敏原)相关的试剂。
第二类
第二类产品:除已明确为第三类、第一类的产品,其他为第二类产品,主要包括:
1.用于蛋白质检测的试剂;
2.用于糖类检测的试剂;
3.用于激素检测的试剂;
4.用于酶类检测的试剂;
5.用于酯类检测的试剂;
6.用于维生素检测的试剂;
7.用于无机离子检测的试剂;
8.用于药物及药物代谢物检测的试剂;
9.用于自身抗体检测的试剂;
10.用于微生物鉴别或药敏试验的试剂;
11.用于其他生理、生化或免疫功能指标检测的试剂。
第一类
1.微生物培养基(不用于微生物鉴别和药敏试验);
2.样本处理用产品,如溶血剂、稀释液、染色液等。
『捌』 简述提取核酸的步骤
一、DNA的分离
利用核蛋白溶于水和高盐溶液,但不溶于生理盐溶液的性质进行分离。
流程:破细胞→浓盐溶液提取→生理盐溶液沉淀→苯酚变性除蛋白→水相DNA用冷乙醇沉淀。
『玖』 进口全自动核酸提取纯化仪哪些厂家的比较好
台湾圆点、美国的SAB、MPfastprep-24、罗氏、贝克曼库尔特、德国QIAGEN个人觉得大同小异,主要得看是不是真的自动化还有试剂盒耗材价格如何。